30立方米空气调节器除病毒试验舱试验步骤（一）

30立方米空气调节器除病毒试验舱有两种评价空气调节器除病毒的试验方法，分别为物体表面上的病毒杀灭测试和气溶胶中的病毒去除测试，前者适用于采用化学因子和其他因子消毒的空气调节器，后者适用于采用物理因子、化学因子和其他因子消毒的空气调节器。

30立方米空气调节器除病毒试验舱物体表面上的病毒杀灭测试：
1、适用的病毒种类
根据试验安全风险，物体表面上的病毒杀灭测试主要针对手足口病毒、甲型流感病毒、冠状病毒以及其他低致病性或非致病性病毒。

2、试验样块的制备
用符合GB/T 411要求的中漂白中平布，其经纱为(21+2)支数，纬纱为(21+2)支数，经过脱浆预处理制成的50 mm*50 mm的方巾。试验前，所有试验样块应在121 C条件下灭菌20 min,烘干后备用。

3、试验步骤
a)试验第一天，将试验用细胞接种到96孔细胞培养板，待细胞生长汇合至单层时备用;
b)将灭菌干燥后的试验样块置于无菌培养皿中,用移液枪吸取0.5mL病毒液逐滴均匀地滴加在试验样块表面，室温条件下待表面微干即可使用;
c)将试验样机放置于30m'试验舱中,分体挂壁式空气调节器放置在舱体的--侧，下沿离地1.8m，分体落地式空气调节器按照正常安装方向放置于试验舱地面中心位置，吊顶式空调按照正常安装方向放置于试验舱地面中心位置。将制备好的试验样块固定于试验样机出风口正中央直线距离1.5 m处；
d)调节舱体环境，满足试验环境要求后，运行样机，作用最长不超过360 min。作用结束后将对照组与试验组布片分别转移至50 mL离心管中，加入4.5 mL无血清DMEM培养基，反复吹打释放病毒，同时取0.5 mL病毒液加入4.5 mL无血清DMEM培养基，吹打混匀作为阳性对照；
e)取上述对照组、试验组、阳性对照各1 mL病毒液上清，离心(3000g, 5min) ，将上清转移至新的EP管，并用无血清DMEM培养基10倍梯度稀释；
f)将50 μL的病毒稀释液加入生长至步骤a)的单层细胞，每个稀释度设置4孔重复；
g)置于37℃、5%CO2孵育2小时，弃去上清液，加入含双抗和1 μg/mL TPCK胰酶的无血清培养基，培养4-5天；
h)每天观察细胞生长状况，记录病变情况。根据Reed-Muench公式计算半数组织感染量TCID50；
i)试验重复三次， 根据试验组和对照组的平均病毒滴度对数值/滴度，计算病毒杀灭对数值/杀灭率。

30立方米空气调节器除病毒试验舱物体表面上的病毒杀灭测试到此结束。